人肝癌细胞PLC／PRF／5细胞培养中常见的问题：微生物污染

人肝癌细胞PLC/PRF/5细胞培养中常见的问题：微生物污染

1，细菌和霉菌污染，等到培养基变浑浊就迟了。

2，当微生物污染较轻时，微生物和细胞可以共生长，细胞仍然长势较好。

3，防止细胞的微生物污染，要做好消毒灭菌，包括培养箱的消毒灭菌，不能抱有侥幸心理。

4，及时换液，保持培养液的相对干净状态，就不易让微生物滋生。

5，及时冻存没问题的细胞，是防止细胞微生物污染的第二保障。

6，倒置显微镜下可以发现的微生物污染，主要是形态异常十分明显的微生物污染，比如链球菌和念珠菌的一串串、细胞之间背景的泥沙样改变，应注意与生长状态欠佳的细胞及细胞碎片鉴别。若倒置显微镜下没发现明显微生物污染，但存在可疑，只能通过特异的检测手段来排除。

7，常规用双抗预防，但是双抗不能抗支原体、衣原体、病毒等微生物，只能抗大多数细菌（青霉素主要抗革兰氏阳性菌，而链霉素能抗阴性菌），这是其局限性。况且抗生素对细胞也是有影响的，在做药理实验时连抗生素也不要加。必要时用到支原体清除剂等产品进行细胞的抢救。