人C2型利钠肽2血清白蛋白融合蛋白质的构建及在毕赤酵母中的分泌表达

摘　要:目的构建重组表达人C2型利尿钠肽(CNP)2人血清白蛋白(HSA) 融合蛋白质的毕赤酵母。方法重叠PCR 拼接CNP(400 bp)2HSA(1 800 bp) 成融合基因,双酶切后克隆至表达载体pPIC9K中。电穿孔法转染毕赤酵母菌KM71 ,摇瓶培养分泌表达。结果融合基因约为2 200 bp ,序列测定正确。SDS2PAGE 分析相对分子质量约为80 000 ,Western blot 和RIA 鉴定显示其为CNP 与HSA 的杂合分子。结论实现HSA2CNP 融合蛋白质在毕赤酵母中的分泌表达。