就是Folin---酚法测定蛋白质含量
原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下,易被酚类化合物还原而呈蓝色反应.蛋白质中含有代酚基的酪氨酸,故有此反应.Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍.
试剂:一:1,4%碳酸钠;2,0.2N氢氧化钠;3,1%硫酸铜;4,2%酒石酸钾钠。1和2等体积混合,3和4等体积混合,然后将两液以50:1混合(甲)。当天使用。二:1NFolin--酚试剂(乙)。
方法:标准曲线;试管中加0、0.2、0.40、0.60、1.00毫升酪蛋白溶液(500微克/毫升),加水补足1毫升,平行做两份。按序各加5毫升试剂(甲),摇匀,室温置放10分钟,再依次加入1N(0.5毫升)Folin----酚试剂(乙),摇匀,30摄氏度保温30分钟。然后在分光光度机上比色测定(A500)。待测样品如上反应和测定,对照标准曲线,得出含量。
注意:酚和柠檬酸对测定有干扰,低浓度尿素,胍,硫酸钠,硝酸钠,三氯乙烯,乙醇,乙醚,丙酮对显色无影响。
LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂......
一、实验目的1、了解测定蛋白质的常用方法2、掌握蛋白质含量测定的经典Lowry–Folin法。二、实验原理在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂......
【摘要】目的:制定宫颈癌片中蛋白质的含量测定方法。方法:采用Lowry法测定含量,以660nm为测定波长测定吸收度。结果:宫颈癌片中水溶性蛋白质在0.048~0.144mg/ml范围内线性关系良好(r......