发布时间:2024-08-11 20:17 原文链接: 体积排除色谱的填料与色谱指标介绍

  在体积排除色谱方法中,柱填料的性质必须与溶质和淋洗体系相匹配。欲分离的高分子样品可能是油溶性的,也可能是水溶性的,前者只能在有机相体系中分离,后者只能在水相体系中分离,填料必须能被淋洗剂所浸润。体积排除色谱方法要求填料与试样尽可能不发生任何基团之间的相互作用,即在色谱过程中应尽可能避免非空间排除效应(如吸附、离子交换、分配等相互作用)的影响,而是完全按照分子尺寸大小进行分离。填料的多孔结构是体积排除色谱方法赖以建立的基础。有关填料的孔结构参数(如孔度、孔径、孔径分布以及孔结构形态等)对于SEC技术来说尤为重要。

  一种高效的体积排除色谱填料,它的化学结构应当能够很好地适应欲分离对象和淋洗体系,并能有效地避免非空间排除现象的发生;它的物理结构除了具备均匀而合适的颗粒度外,还需要有光洁的表面(包括孔壁表面)、规整而通畅的孔结构形态、较大的孑L度以及适当的孔径大小与分布。

  SEC填料的色谱表征,除了前面所述的柱效、选择性、分离度、穿透性等参数以外,还需满足如下三项色谱指标要求。

  1、排除极限

  表示填料可以用来分离高分子物质的最大限度、超过这个限度溶质就会在填料的粒隙间穿过而没有分离效果。排除极限主要取决于填料最大的有效孔径。 

  2、分离范围

  表示填料可以分离高分子物质的分子量范围。它一般指分离柱的分子量一淋洗体积校正曲线的线性部分。分子量高于和低于这个范围的溶质分别被排除和渗透,均没有分离效果。分离范围主要取决于填料有效孔的分布范围。对于高分子类型SEC填料,分离范围通常以相差2个数量级的分子量为宜。

  3、固流相比

  指填料的有效孑L内体积与填料的颗料间隙体积之比值。它反映了色谱柱的分离容量,其值越大越好。在紧密填充的条件下,固流相比主要与填料的孔度有关。

  以上所述,既是填料在制备过程中的主要研究内容,也是填料在应用过程中的重要参考依据。