体细胞融合实验

细胞

PEG-1000

培养基

1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度（80% 汇合率）。

2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基，加 2 ml 50% PEG-1000，轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。

3. 往培养皿或瓶中加 5 ml 完全培养基以稀释 PEG 溶液。

4. 吸净培养皿或瓶中的液体，再加 5 ml 培养基洗涮细胞，进一步稀释 PEG。

5. 再洗一次细胞，之后，加 5 ml 新培养基。

6. 细胞放回 37℃ CO₂ 培养箱，过夜。

7. 恰当地处理细胞：可以消化细胞并重新接种和/或进行生化筛选。

8. 筛选细胞：融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。