发布时间:2022-11-28 14:24 原文链接: 何谓正相色谱和反相色谱?在应用上有什么特点

1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。

应用特点:正相色谱一般用来分离中性化合物和离子(或可电离的)化合物,而且以中性样品为主。适于分离样品如下:

①对于反相色谱法很难分离的异构体,可以采用以硅胶为固定相的正相色谱分离分析;

②根据被分离样品极性差别进行族类分离;

③易于水解样品的分离分析;

④分离分析高脂溶性样品,其在极性有机溶剂中溶解度很小;

⑤正相色谱也可以用于异构体分离(包括几何异构体和光学异构体)。

2、流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高,可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。

应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。


相关文章

高效液相色谱填料应如何选择(1.2)

2、反相色谱反相色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组份最先被......

色谱柱——硅胶基质填料

1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因......

赛分科技推出抗体分析液相色谱方法包

抗体是免疫系统中一类重要的蛋白质,它们通过特异性方式来结合抗原。这一特性使之在诊断、治疗、基础研究等方面具有巨大的价值。抗体由四条多肽链构成,两条重链和两条轻链,通过二硫键连接而成。它们通常被糖基化,......

人眼晶状体蛋白质二维液相色谱串联质谱初步检测

【摘要】目的运用二维液相色谱串联质谱(SCX2RPLC2MS/MS)的方法,初步探讨建立健康成人眼晶状体的蛋白质数据库的实验方法,为研究晶状体的相关疾病提供数据基础。方法晶状体蛋白质混合物被尿素溶解后......

反相高效液相色谱法同时测定片剂中的加替沙星与盐酸氨溴索(英文)

《色谱》2008年03期      反相高效液相色谱法同时测定片剂中的加替沙星与盐酸氨溴索(英文) SHAHEDMirza;NAN......

真空溶剂蒸发全二维液相色谱接口及其应用

《分析化学》2008年06期      真空溶剂蒸发全二维液相色谱接口及其应用 田宏哲;徐静;关亚风 以正相色谱(NPL......

蛋白质马心肌红蛋白含量测定高效液相色谱反相色谱法

本方法适用于应用反相高效液相色谱进行马心肌红蛋白的含量测定。......

蛋白质重组人肿瘤坏死因子衍生物纯度分析高效液相色谱反相色谱法

本方法适用于应用反相高效液相色谱进行重组人肿瘤坏死因子衍生物的纯度分析。......