你的小鼠有资格进SPF级动物房吗？

中国和美国的实验室也许能够找到几乎一样的SPF小鼠，却没人敢保证可以在上海和纽约的宠物店买到同样的“脏鼠”？似乎干净的小鼠都是一致的，而污染的小鼠却各有各的疾病。试想如果将这些“脏鼠”作为模式生物，不稳定的性状和难以重复的实验数据的定会令人头疼。因此稳定的---SPF小鼠对于科研筒子们来说至关重要。

很多人肯定有这样的疑问，面对美国jax或者其他动物房来源的小鼠，路途跋涉，如何保证小鼠干净并顺利进入SPF动物房呢？照个紫外，灭灭菌传递进去就好了？然而事情似乎远远比我们想象的要复杂，下面就一起跟随着小鼠感受一下它所经历的考验吧。

SPF级动物房系统

为了保证小鼠的健康和疾病预防，一般外来小鼠必须经过隔离和净化才能进入如上图所示的SPF级动物房内生活。原来小鼠过上养尊处优的生活也是蛮不容易的呢！

隔离和净化目的：疾病防疫，防止鼠群感染

作为实验动物，实验前必须要确定健康无病，一般国内外最广泛使用的即SPF级，指体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物，实际上在指无传染病的健康动物。为了避免实验小鼠群体被感染疾病，保持鼠群的健康，必须对外来小鼠做好疾病预防工作。

1、什么是隔离？

将进出境或国内调运的有关动物在检疫机关指定的场所内，于隔离条件下进行饲养，并在其生长期间进行检验、检测和处理的一项措施，通过隔离检疫可以避免或减少前期微生物风险预评中的漏检问题，更为有效的控制有害生物的输入或输出。

隔离环境：以隔离器为主体及其它附属装置组成的饲养系统，是独立通风饲养系统、进入的全新风洁净度达100级，无菌并维持正压状态，一切物品都要严格灭菌后经传递窗送入，操作时，工作人员只能通过隔离器上的橡胶手套来进行饲养或实验。

隔离器系统

隔离的步骤：

按规定，凡进口小鼠，必须在隔离室进行检疫观察饲养1个月，隔离结束后，根据实验需求继续国内配送小鼠或转入净化、代繁部门。

隔离分为两种：

① 输入隔离：进口小鼠

如直接引进JAX来源小鼠，必须隔离器满1个月，并提供相应的隔离检疫报

② 输出隔离：出口小鼠

小鼠进入隔离器隔离，一个月内，按照出入境及外方检疫要求安排微生物检测，出具检测报告，以备出口单证使用

2、什么是净化？

针对于外来小鼠需要进入无菌动物房，由于各种原因如接触到外界环境，小鼠可能被病原体感染，为了保证小鼠健康，干净净地顺利进入动物房，必须经过净化这一步。如下：

净化目前的技术主要是：体外受精--胚胎移植(IVF-ET)技术

体外受精（In Vitro Fertilization, IVF）和胚胎移植（Embryo Transfer,ET）

IVF-ET技术基本原理：小鼠自身虽然可能被感染，但是小鼠的精子或卵细胞在体内是干净无菌，借用体外受精这项辅助生殖技术，将雄性小鼠精子和雌鼠的卵细胞交配得到受精卵后，再“借腹生子”移植到代孕小鼠，得到您需要更多的SPF级小鼠。

随着基因修饰的小鼠大量涌现，我们却经常面临着小鼠数目不够，如从国外代购的小鼠只有4-5只，或者友情赠送2只转基因小鼠，这样的数量很多时候无法满足我们实验的需求，IVF技术既可以满足小鼠净化，又可以获得更多转基因小鼠。

下面我们以这类基因修饰的小鼠为例，假设只提供雄鼠为例，介绍净化步骤：

（IVF-ET技术具体步骤可参考我们往期的实验技巧文章2.4和2.8）

注意，净化基因修饰小鼠有几种情况：

① 如果提供的是雄性小鼠，一般2-3只，一般得到的是杂合子，周期：2-3个月，

如果还需要得到纯合子，周期更长，大概5-6个月

② 如果提供雄性（2-3只）和雌性小鼠（10只以上），获得纯合子，周期：2-3个月

体外受精技术优点：

目前小鼠体外受精、胚胎移植技术已经是相当成熟, 有时只需要一只雄鼠，超排技术获得大量的卵后,就能进行体外受精和胚胎移植, 既可节省动物, 也可加速生物净化节奏。

特别是针对基因编辑小鼠：大多数的转基因、敲除或者单基因突变的品系多半呈现生育和哺育幼仔能力低下，IVF-ET技术既可达到净化目的, 又加速种群的繁殖。

鉴于此，您完全不用再担忧您的小鼠不够干净或者数目不够，只要经过了隔离或者净化，您的小鼠就有资格进入动物房进行试验了，就不怕得不到可靠的实验数据了。