方法条件

 

SFC梯度和流速程序

对于所述的全部数据而言,100 g/分钟的最大总流速与各种等度的改性剂程序配合使用。

 

质谱检测器的条件

用于各种试验的3100型质谱检测器标准ESI模式使用以下关键参数:

毛细管电压: 3.5 KV

锥孔电压: 40.0 V

二级锥孔电压: 3.0 V

射频透镜电压: 0.1 V

源温度: 150 ˚C

脱溶剂气温度: 350 ˚C

脱溶剂气体流速: 400 L/小时

锥孔气体流速: 60 L/小时

0.1%的甲酸-甲醇溶液用作补偿液流进入质谱,以提高电离效率。

 

数据管理

MassLynx/FractionLynx,第4.1版

 

结果和讨论

 

叠加进样模式下的纯化放大

手性分离中通用的最佳做法是利用叠加进样模式进行样品进样和馏分收集,这可实现效率最大化并降低生产成本。

 

在含有一定杂质的复杂体系中,质谱引导的系统可以鉴定和选择性的收集感兴趣的目标化合物,并正确的忽略不需要杂质。因而,该系统对于手性化合物的SFC纯化,具有高效、适用范围广的特点,并成为手性药物开发的常规主流工具。

 

我们对质谱引导的Prep100 SFC系统进行了一定的改造,以便将该系统用于手性化合物分离纯化时达到其最大效益,其中包括添加了一个专用进样器并改变了收集床布局以容纳更大的容器,从而可重复收集对映体的馏分。

 

层叠进样/进样器的启用

Prep 100 SFC系统整合了一个沃特世叠加进样模块,用户选择“进样类型”并输入叠加进样的总次数以及软件程序中的其它相关参数,如图1和图2所示。以叠加进样的模式,运行一个自定义的进样序列,该进样器可从单一样品容器中抽取多份等量样品。

未使用叠加进样模式时,2767型样品管理器能继续按照“样品列表”所定义的顺序从样品架上逐个进样单一样品。

 

图3显示了对一种双峰混合物进行叠加进样后得出的典型色谱图。紫外和质谱对所需物质的检测结果均是正确的,从而确保了通过紫外或质谱触发可进行可靠而成功的馏分收集。在本例中,紫外信号用作收集触发;必要时也可使用质谱信号。