使用HPLCMS／MS检测鸡蛋和组织中的二甲硝唑

广东省兽药研制与安全评价重点实验室的研究人员建立了高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）方法，用于精准检测二甲硝唑（DMZ）及其代谢物2-羟甲基-1-甲基-5-硝基咪唑（HMMNI）。

中国广州华南农业大学兽医学院广东省兽药研发与安全评价重点实验室最近开展的一项研究 (1) 报告了高效液相色谱串联质谱 (HPLC-MS/MS) 方法的开发，用于精确检测二甲硝咪唑 (DMZ) 及其代谢物 2-羟甲基-1-甲基-5-硝基咪唑 (HMMNI)。研究结果表明，组织和鸡蛋中 DMZ 和 HMMNI 的浓度在 1~100 ng/g 范围内呈强线性关系。

DMZ 是一种应用广泛的硝基咪唑类药物，具有广谱抗厌氧菌和抗原虫活性，并具有强效抑制螺旋体的作用，常用于治疗组织单胞菌病（黑头病或传染性肠炎）。DMZ 也常与其他抗生素在临床上用于治疗厌氧菌和需氧菌混合感染。DMZ 预混剂因其功效、方便和成本效益而被用作饲料添加剂，但先前的动物研究发现，DMZ 的遗传毒性潜力尚无法判断，但有致癌性。因此，一些国家已禁止 DMZ 用于食用动物，或仅批准用于治疗疾病。

由于目前对食品中 DMZ 或其代谢物残留安全水平的确定数据有限，目前联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会（JECFA）要求所有动物食品中不得检出 DMZ（2），对 DMZ 在食用动物中的使用规程提出了更高的要求。本文作者希望为 DMZ 在家禽养殖中安全合理地应用建立科学依据，开发了 HPLC-MS/MS 方法同时分析肉鸡组织和鸡蛋中 DMZ 和 HMMNI 的浓度。他们还以三黄鸡和海兰灰蛋鸡为试验对象，研究了 DMZ 在肉鸡和蛋鸡体内的消除模式，并提出了相应的停药时间和鸡蛋弃置期。

作者指出，目前检测动物组织中硝基咪唑的主要方法是薄层色谱法 (TLC)、气相色谱法 (GC)、高效液相色谱法 (HPLC)，但他们采用的 HPLC-MS/MS 方法灵敏度高、分离效果好、节约成本。他们的研究表明，在肉鸡组织和鸡蛋样品中，HMMNI 的残留量始终高于 DMZ。皮脂（一种保护和滋润皮肤表面的油性物质 [3]）是 DMZ 和 HMMNI 的累积组织，消除速度最慢。在鸡蛋中，DMZ 和 HMMNI 的残留量在停药后第一天达到峰值，随后缓慢消除，消除半衰期分别为 0.45 和 0.66 天。

本研究条件下，利用WT1.4软件测得肉鸡停药时间为262.97 h（10.96 d），蛋鸡停药后弃蛋期为13.45 d。因此，从实际出发，作者建议肉鸡停药时间为11 d，蛋鸡停药后弃蛋期为14 d。

Chicken and eggs. © GrafitiRex - stock.adobe.com

References

1. Mo, K.; Wei, C.; Bai M.; Long X.; Liu, X.; Ding, H. Elimination Patterns of Dimetridazole in Egg of Laying Hens and Tissues of Broiler After Oral Administration. Frontiers in Veterinary Science, 2024, 11. DOI: 10.3389/fvets.2024.1451904

2. World Health Organization. Residue Evaluation of Certain Veterinary Drugs: Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives, 94th Meeting (Virtual), May 16–27, 2022. Food and Agriculture Organization, 2023.

3. What is Sebum? Medical News Today website. https://www.medicalnewstoday.com/articles/sebum#function (accessed 2024-08-07).