| 实验方法原理 | 将培养物放在显微镜的载物台上,打开电源,选择合适的镜头,聚焦于标本。如果必要的话,将聚光器和相差环调节在中心。 |
|---|---|
| 仪器、耗材 | 倒置显微镜 擦镜纸 |
| 实验步骤 | 1. 确保显微镜(配有相差10×、20× 或40× 的物镜及聚光器和合适的相差环)洁净(用 70 % 乙醇擦拭载物台。如果有必要,用擦镜纸清洁物镜)。 2. 打开电源,将灯光强度从最低开始调至合适的强度,而不是直接打到强光。 3. 检查光源与聚光器的衔接: (a)将一张染色切片、培养瓶或培养皿放在载物台上; (b)关闭视场光圈; (c)聚焦在可变光阑上; (d)将可变光阑成像调整到视野的中央。 4. 将相差环调至中央: (a)如果显微镜配有相差望远镜,将之插入标准目镜位置,然后聚焦于相差环,检査聚光器环(黑色背景中的白环)是否与物镜环(白色背景中的黑环)同轴; (b)如果没有相差望远镜,则将染色的标本换为没有染色的培养物(活的或固定的培养物),重新聚焦,调整相差环,直到获得最优对比。 5. 观察细胞。10× 相差物镜作为常规观察已足够,4× 相差物镜不能提供足够的细节资料,而高于 10× 的放大倍数则限制了观察区域。 (a)注意生长期(例如,稀疏、亚汇合、汇合、致密); (b)注意细胞状态(例如,清亮、透明或有颗粒、有空泡等)。 6. 检査培养基的清亮程度(例如,无碎片、漂浮的颗粒、污染迹象等),根据需要选择一个放大倍数更高的物镜。 7. 记录观察的结果。 8. 旋低变阻器(把灯光调暗),关掉电源。 9. 将培养液放回孵箱,或放在超净台上进行无菌操作。 |