叶片的Pn受内部生理因素如生育期、叶龄、不同部位叶片的影响,还受到环境因素光、温、水、CO2、风速等的影响。因此,要正确的比较处理间的光合差异,掌握测试方法是非常重要的。
1)选择同样生育期、相同叶龄、部位的叶片进行比较。如光合作用对产量的影响会随作物生育期不同而不同,因此,据研究目的首先应确定测试的时期。对大量的基因型进行测定时,要在做好生育期调查记载的同时,按生育进程分组、分批测定,同时在测试时有目的地选择一些有代表性的植株,使试材间生育期不同造成的影响在一定程度上降到低。
2)测试叶位的选择。对于品种、处理间的比较,一般选择对产量影响大、光合速率高的叶片,如小麦、水稻为旗叶,玉米为棒三叶(以穗上叶为,其叶片倾角受穗大小的影响较小),棉花打顶前为倒5展叶,打顶后为倒一展叶。
3)测定时期的选择。根据不同的研究目的选择适宜的测定时期非常重要,这样可避免盲目测定,尽量减少测定次数而达到zui佳效果。因此,有必要先了解研究对象作物光合的大致特性。如小麦、玉米、水稻等作物单叶大光合一般出现在叶片展开至展开后的几天,玉米群体光合zui大值出现在抽雄至吐丝期,棉花出现在盛花至盛铃期。
4)测定时间的选择。C3作物如小麦、棉花等大都有明显的光合"午休"现象,其一日内光合大值一般出现在上午的9:30一11:30(当地时,下同),午休出现在12:00一14:00。因此,对一批材料的测试可在9:30一11:30前后测完,或在9:30一11:30测完重复,在12:00一14:00测完第二重复,在15:00一16:30测完第三重复。玉米等C4作物不表现"午休"现象,Pnzui高值出现在中午,因此可在11:00一14:00时光强较稳定时测定。对大量材料采用轮回测定的方法,并熟练掌握操作技术,以缩短整个测试过程。并通过调节叶室向光方向,使一批样能在相对统一的光强下完成测定,以避免不同材料由于入射PAR差异而产生误差。
5)供试材料的准备。(1)在测定之前不要让供试材料遭受急剧的环境变化。特别是冬季,温室栽培植物不要直接搬到屋外低温环境条件下。(2)带入室内的供试材料尽可能放在明亮的地方,当长时间放在照度低的地方时,由于气孔完全关闭,测定开始后到出现光合速率大值要花费较多时间。(3)用离体叶测定时,要用刀片在水中剪断,输导组织内的水不要断开。(4)选生长健康、代表性强的植株为试材。此外,由于源库具一定的互作关系,应该在确定库容量、授精或者输导过程无异常的情况下进行测定。
6)测定呼吸速率时用两层黑布罩在叶室上,待CO2稳定释放后采样。
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