光学显微镜微分干涉相衬法成像光路系统的调整方法介绍

　　为了克服相差法观察时样品细节像周围伴随有光晕，会掩没掉本来应该看见的细节，以及样品或组织切片厚度要求相当薄，原则上下能厚于10m等局限性，利用双光束干涉的原理设计光学显微镜微分干涉相衬法成像光路系统的调整方法。

　　一、调整方法：

　　a. 必须在库勒明系统已调好的基础上才能调好DIC；

　　b. 先用10×物镜，以明视野先确定好能把样品看清晰的物镜调焦位置；

　　c. 把起偏器（polarizer）摆入照明光路中，注意其取向应为东–西方向；

　　d. 把聚光镜转盘转到与10×物镜对应使用的位置上，即DIC 0.3–0.4；

　　e. 在物镜后方或物镜转换器上插入10×物镜使用的DIC插片（DIC slider）；

　　f. 把检偏器（analyser）插入成像光路中，注意其取向应为南–北方；

　　g. 换上待观察的透明样品，开亮光源把样品调焦清晰；

　　h. 调节DIC插片，使微分干涉相衬的像达到最佳效果，也就是浮雕效果最为明显；

　　i. 同时可调节聚光镜的孔径光阑，使反差的效果也达到最佳；

　　j. 然后再细微调样品的细节，可见样品中不同层面上的结构；

　　k. 如果把补色器（first order red retardation plate）插入，并同时调节DIC插片，可在视野中看到不断变化的绚丽色彩，红、橙、黄、绿、蓝、紫、粉红、粉紫及金黄色都具有。

　　二、适用范围：透明或不能染色的组织切片，厚度可达100μm左右，培养中的活组织和活细胞、小生生物等。