抗原与抗体是血清学反应的物质基础。抗原的制备与纯化是获得特异性抗体的先决条件，所得到的抗体又可反过来纯化和检测抗原。
(一)抗原的制备
抗原种类繁多，按其物理性状可分颗粒性和可溶性两类。前者指细胞性抗原(包括细菌抗原)，其制备较为简便，一般用新鲜细胞以无菌生理盐水或磷酸缓冲液洗涤后配成一定浓度。若系细菌抗原，则取新鲜培养物，经集菌作如下处理，H抗原因不耐热用0.3%～0.5%甲醛处理，O抗原耐热可加热100℃2h去除H抗原后应用。可溶性抗原可以是细胞膜、细胞浆、细胞核及核膜等细胞组成部分，也可能是经细胞分泌至体液中的一些可溶性因子。细胞组成部分常需经过机械或酶解法等破碎、离心获得粗制抗原，并通过选择性沉淀或层析等方法进一步纯化。而体液中(如血清等)的可溶性抗原则可直接用生化手段获得所需成分。有些可溶性抗原仅具有免疫反应性，而无免疫原性，此类抗原尚需与载体偶联方可成为完全抗原。
(二)抗体的制备
单克隆抗体和多克隆抗体：单克隆抗体(McAb)用杂交瘤技术制备(详见第三章)，其特点：特异性好，亲和力高，只识别一个表位。多克隆抗体(polyclonal antibodies)存在于免疫动物的血清中，可通过直接分离血清获得，主要应用于免疫学诊断。也可经中性盐析和层析法进一步提出单一类别的免疫球蛋白(多为IgG)，使诊断及各种研究在更精确的水平上进行。优点：可识别多个表位，缺点：特异性差，易出现交叉反应，亲和力低，通过其他抗原的吸收可获得针对单个抗原决定簇的单价因子血清。