共定位的计算

用于计算另一相关系数的较简单的技术，需要去掉原始像素强度值和平均像素强度值这个差减项。 正式定义为 Overlap 系数（ R） ，这个值范围从 0 到 1，在图像分析中对强度变化不敏感。 Overlap 系数定义为：

分子是两个通道强度的乘积和，只有当同一个像素的两个通道值与共定位相关时，分子才会给出一个很有意义的值（两个通道的像素强度值都大于 0）。因此，方程（ 2）的分子与共定位的像素数成正比。同理， Overlap 方程的分母正比于图像两个通道组分的像素数，而不考虑共定位是否存在（注意：组分定义为通道 1 和通道 2 红颜色和绿颜色的图或像素阵列）。 Overlap 系数的一个主要优点就是对一个图像上各种组分的信号强度差相对不敏感，信号强度差经常是由荧光团的浓度差、光漂白、量子效率变化及非等效的电子通道设置等产生的。