1、初次使用亚叶酸钙片，应在有经验医师指导下用药。
2、亚叶酸钙片不宜与叶酸拮抗剂(如甲氨喋呤)同时使用，以免影响后者的治疗作用。应于大剂量使用甲氨喋呤24～28小时后应用本品。
3、当患者有下列情况者，本品应慎用于甲氨喋呤的"解毒"治疗；酸性尿(pH<7)、腹水、失水、胃肠道梗阻、胸腔渗液或肾功能障碍。有上述情况时，甲氨喋呤毒性较显著，且不易从体内排出；病情急需者，本品剂量要加大。
4、接受大剂量甲氨喋呤而用本品"解救"者应进行下列各种实验室监测：
(1) 治疗前测肌酐清除率；
(2) 应用甲氨喋呤大剂量后每12～24小时测定血浆或血清甲氨喋呤浓度，以调整本品剂量和应用时间；当甲氨喋呤浓度低于5×10-8mol/L时，可以停止实验室监察；
(3) 应用甲氨喋呤治疗前及以后每24小时测定血清肌酐量，如用药后24小时血清肌酐量大于治疗前50%，提示有严重肾毒性，要慎重处理；
(4) 甲氨喋呤用药前和用药后每6小时应监测尿液酸度，要求尿液pH保持在7以上，必要时用碳酸氢钠和水化治疗。