发布时间:2024-08-21 08:42 原文链接: 关于兔网织红细胞系统的基本介绍

  兔网织红细胞系统:网织红细胞无细胞核,其合成的蛋白质90%l 人上为珠蛋白。兔网织红细胞用活大白兔制备,通过纯化除去兔网织红细胞以外的污染细胞。网织红细胞裂解后,提取物用微球菌核酸酶破坏内源mRNA,最大限度地降低翻译背景。裂解物包含蛋白质合成所必须的细胞内组分(tRNA,核糖体,氨基酸,起始、延伸、终止因子)。为了使系统更适于mRNA 的翻译,兔网织红细胞中还添加了磷酸肌酸和磷酸肌酸激酶的能量生成系统以及氯化高铁血红素防止翻译起始的抑制,此外还添加了tRNAS 混合物用于扩大mRNA 翻译的范围以及乙酸钾和乙酸镁等。兔网织红细胞具有一定的翻译后加工活性,包括翻译产物的乙酰化异戊二烯化、蛋白酶水解和一些磷酸化活性。

  兔网织红细胞系统在真核体外翻译系统应用最广泛,常用于较大的mRNA 种类鉴定、基因产物性质分析、转录和翻译调控研究,以及共翻译加工研究等。