照高效液相色谱法（2010年版药典二部附录ⅤD）测定。
1、色谱条件与系统适用性试验
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇－水（25：75）为流动相；检测波长为210nm。取单硝酸异山梨酯对照品与2-单硝酸异山梨酯对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中各约含5μg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，理论板数按单硝酸异山梨酯峰计算不低于3000，单硝酸异山梨酯峰与2-单硝酸异山梨酯峰的分离度应大于2.0。
2、测定法
取本品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取单硝酸异山梨酯对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
3、制剂
（1）单硝酸异山梨酯片
（2）单硝酸异山梨酯注射液
（3）单硝酸异山梨酯胶囊
（4）单硝酸异山梨酯缓释片
（5）单硝酸异山梨酯葡萄糖注射液
（6）单硝酸异山梨酯氯化钠注射液