发布时间:2024-07-10 20:07 原文链接: 关于多焦点多光子显微技术的简介

  多焦点多光子显微技术是 20 世纪末发展起来的, 它与单光束激光扫描显微镜 相比最大的变化是:

  (1) 需要一 个光束分离装置(如右图)产生多个焦点;

  (2) 需要一个探测器能够探测从所有焦点处发出的荧光信号 。

  多焦点多光子显微技术采用旋转微透镜盘 、微透镜阵列 [6]、级联分束镜 [7]或衍射光学元件 [8]将飞秒激光器输出的光分成许多子光束 ,经过显微镜的中间光学系统和物镜后聚焦到样品上 , 产生衍射极限激发光点阵, 实现样品的多焦点多光子并行激发 ,通过旋转微透镜盘或检流计振镜扫描子光束来实现这个激发点阵在样品上的扫描, 同时采用置于系统非解扫通道的面阵 CCD 相机接收样品的荧光显微图像。通过对样品的多焦点多光子并行激发和探测, MMM 极大提高了成像速度。

  另外, 多焦点多光子显微技术在提高成像速度的同时, 也提高了多光子激发荧光显微术对光源光能的利用率 ,而这也是传统的单点扫描多光子激发显微中存在的一个问题 。多光子激发荧光显微技术所用光源一般是超短脉冲锁模激光器 , 如钛宝石锁模飞秒激光器 ,其所输出激光脉冲的平均功率为 1~2 W 而实际上,受样品非线性损伤的限制, 传统的单点扫描多光子激发荧光显微所需的光功率大约为 3~10 mW因此, 对光能的利用率很低。同时, 这种并行的测量过程并没有显著影响空间分辨率。

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