1.空腹血生化检测
生化异常包括低血糖、酮症酸中毒、乳酸血症及高脂血症。重症低血糖常伴有低磷血症。三酰甘油、胆固醇脂肪酸和尿酸均显著增高
2.糖耐量试验
呈现典型的糖尿病特征。患儿空腹血糖低而果糖耐量试验和半乳糖耐量试验特异性增高。由于患儿不能使半乳糖或果糖转化为葡萄糖，因此在半乳糖或果糖耐量试验中血葡萄糖水平不见升高。
3.肾上腺素试验
皮下注射1∶1000肾上腺素0.02ml/kg，注射前和注射后10，20，30，40，50，60分钟，分别测血糖，正常者血糖上升40%～60%；糖原贮积病患儿血糖无明显上升。
4.胰高血糖素试验
胰高糖素或肾上腺素试验亦不能使患儿血糖明显上升。糖肌注胰高血糖素30µg/kg（最大量1mg），于注射后0，15，30，45，60，90，120分钟分别取血测血糖。正常时15～45分钟内血糖升高1.5～2.8mmol/L，原贮积病葡萄糖-6-磷酸酶缺乏时在空腹或餐后均无血糖升高。
5.活组织检查
（1）肝脏活组织检查 可见肝细胞增大，糖原增加；葡萄糖-6-磷酸活性酶降低或消失。
（2）肌肉活组织检查 糖原含量稍增加，糖原结构正常，血小板中葡萄糖-6-磷酸活性酶亦可降低或消失。
6.基因检测
可通过外周血白细胞DNA分析进行基因检测。
7.血小板膜检查
血小板膜释放ADP能力减低，因此其黏附率和聚集功能低下。多数患儿肝功能正常。
8.影像学检查
X线检查可见骨质疏松和肾脏肿大。脊柱、头颅X线仅有轻微改变。
B超和CT扫描可发现肝、肾肿大，少数病程较长患儿肝脏并发有单个或多个腺瘤。