发布时间:2024-08-23 18:16 原文链接: 关于快速测试片法的基本方法介绍

  测试片为预先制备好的培养基系统和一种冷水可溶性的凝胶剂,以及由于检测项目不同而不同的指示剂。它由上下两层薄膜组成,下层的聚乙烯薄膜上印有网格并且覆盖有细菌生长的培养基,上层是聚丙烯薄膜。使用时只需接种一毫升待测样品的稀释液在下层的培养基上,盖上上层聚丙烯薄膜,此时聚乙烯层上的培养基由于水的作用生成水合物,适合细菌的生长。我们在实验中用得最多的是3M Petrifilm检测片。

  菌落总数测试片筛选白色、无毒、中速、密度均匀、吸附力合格的滤纸,将滤纸裁剪成合适的尺寸,通常1.0cm X 5.0cm大小。将灭菌的TTC加大到无菌的培养基后,将无菌滤纸浸入其中,根据需要控制滤纸的培养基吸附量,以适宜的温度干燥,分装于己灭菌的聚丙烯塑料口袋内,密封备用。使用时把1mL待测液加于纸片上,压平后置于37 ℃培养箱培养16~18h,即可计数。检测纸片为一次性使用,使用后焚烧处理即可。通过实验对快速测试片法和国标方法进行对比,结果显示两种方法在统计学上无显著性差异,但由于滤纸具有较大的间隙,菌体长在纤维之间而使肉眼无法判断,所以一般比实际菌数要少。

  大肠菌群、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌是食品微生物检测中的常规项目,通常采用的传统方法需要大量的人力物力和较长的培养时间,而采用Petrifilm大肠菌群和大肠杆菌计数纸片(PEC)和Petrifilm金黄色葡萄球菌测试片(STX)只需24~48小时。大肠菌群、大肠杆菌检测纸片含有改良的VRB(Violet Red Bile)培养基及葡萄糖普酸酶指示剂。绝大多数大肠杆菌能产生R一葡萄糖普酸酶,与培养基中的指示剂反应,产生蓝色沉淀环绕在大肠杆菌菌落周围,表面覆盖的胶膜,可留住发酵乳糖产生的气体,形成蓝色和深蓝色的菌落并有气泡相连。大肠菌群菌落在测试片上产酸,pH指示剂使培养基变为暗红色,在红色菌落周围有气泡者为大肠菌群。所以,一次测试即可测出大肠杆菌和大肠菌群数:带气泡的蓝色和红色菌落为大肠菌群,带气泡的蓝色菌落为大肠杆菌。