是指在治疗性手术或探查性手术进行当中所做的活检，一般在20～30分钟内完成定性诊断，以便指导手术如何进行。应用最多的是快速冷冻制片技术，用不经固定的新鲜标本，快速冷冻至零下18℃以下，进行切片、HE染色进行观察诊断。所以也称“术中冷冻”、“快速冷冻”或“冰冻切片”，有时也可使用快速石蜡切片技术或细胞学检查技术。
