抗生素的效价常采用微生物学方法测定,它是利用抗生素对特定的微生物具有抗菌活性的原理来测定抗生素效价的方法,如管碟法(cylinder plate method)。管碟法是根据抗生素在琼脂平板培养基中的扩散渗透作用,比较标准品和检品两者对试验菌的抑菌圈大小来测定供试品的效价。管碟法的基本原理是在含有高度敏感性试验菌的琼脂平板上放置小钢管(内径6.0±0.lmm,外径8.0±0.lmm,高10±0.lmm),管内放入标准品和检品的溶液,经16~18小时恒温培养,抗生素扩散的有效范围内则产生透明的无菌生长的区域,常呈圆形,称为抑菌圈(图实验-18)。抑菌圈直径大小与抗生素浓度相关,比较抗生素标准品与检品的抑菌圈大小,可计算出抗生素的效价。抗生素效价常采用二剂量法。将抗生素标准品和供试品各稀释成一定浓度比例(2:1或4:1)的两种溶液,在同一平板上比较其抗药活性,再根据抗生素浓度对数和抑菌圈直径成直线关系的原理来计算供试品效价。取含菌层的双层平板培养基,每个平板表面放置4个小钢管,管内分别放入检品高、低剂量和标准品高、低剂量溶液。先测量出四点的抑菌圈直径,按下列公式计算出检品的效价。
(1) 求出W和V:
(2) W=(SH+UH)-(SL+UL)
(3) V=(UH+UL)-(SH+SL)
式中: UH:供试品高剂量之抑菌圈直径
UL:供试品低剂量之抑菌圈直径
SH:标准品高剂量之抑菌圈直径
SL:标准品低剂量之抑菌圈直径
求出θ:(2) θ=D·antilog(IV/W)式中:
θ:供试品和标准品的效价比
D:标准品高剂量与供试品高剂量之比,一般为1
I:高低剂量之比的对数,即log2或log4。
求出Pr : (5) Pr = Ar×θ 式中:
Pr:供试品实际单位数
Ar:供试品标示量或估计单位