环丝氨酸可用发酵法或直接合成法制备。发酵法产生菌是赖氏放线菌（Actinomyceslaven-dulae），发酵培养基为糊精；葡萄糖；淀粉；黄豆饼粉；酵母粉；硫酸铵；硝酸铵；碳酸钙；氯化钠；硫酸镁和豆油等。合成法是将β-氨基氧丙氨酸乙酯二盐酸盐和氢氧化钾反应，即环合得到环丝氨酸。
