磷霉素氨丁三醇为白色或类白色结晶性粉末；无臭，味咸；有引湿性。 本品在水中极易溶解，在甲醇中溶解，在乙醇中极微溶解，在三氯甲烷中不溶。 比旋度 取本品，精密称定，加水溶解制成每1ml中含50mg的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度为-2.0至-4.0。
（1）取磷霉素氨丁三醇约50mg，加高碘酸钠试液2ml，钼酸铵试液数滴与硝酸数滴后，加热即发生黄色沉淀，分离，沉淀能在氨试液中溶解。
（2）取磷霉素氨丁三醇及磷霉素标准品，分别加0.2mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液制成每1ml中含磷霉素20mg的溶液。照薄层色谱法（附录Ⅴ B）试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-乙酸乙酯-水-冰醋酸（4:2:3:1）为展开剂，展开，晾干，喷以显色液（取磷钼酸5g，加醋酸100ml，再加硫酸5ml），置105℃加热20分钟后检视。供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与标准品溶液的主斑点相同。
（3）磷霉素氨丁三醇的红外光吸收图谱应与磷霉素氨丁三醇标准品的图谱一致（附录Ⅳ C）。 如果已做（3）项，则（1）、（2）项可不做。