发布时间:2023-03-22 15:58 原文链接: 关于聚合酶连式反应的操作体系介绍

  (1)模板:其中包含有目的基因片段,PCR反应的模板是待检测核酸(DNA或RNA)分子,双链DNA可直接用于反 应,而RNA则需要用反转录酶反转录成为cDNA,然后用作聚合酶反应的模板。

  (2)DNA聚合酶:最初的聚合酶链反应是用DNA聚合酶I的Klenow片段或T4DNA聚合酶催化的。但是由于每轮反应都需要三个温度点,最初的PCR需要在每轮反应中加人DNA聚合酶。以后应用耐热TaqDNA聚合酶后,一次加酶反应到底的问题才得以完满的解决。

  (3)一对引物:这是两个人们根据已知DNA序列的、由人工合成的、与所要扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段,即左右端引|物。

  (4)四种三磷酸脱氧核苷(即dNTP):这是合成DNA所需要的原料。

  (5)适当的缓冲液体系。