反向限制性酶切位点突变分析法(inverserestrictionsitemutation，iRSM)由英国威尔士大学分子遗传和毒理中心建立并完善的。iRSM适用于快速检测诱变剂所致体内外DNA的突变，但这些突变的特点是使某一酶切位点变为另一酶切位点。该方法建立者Jenkins等首先将iRSM应用于化学诱变剂所致动物体内p53基因的突变检测，取得了良好的结果:小鼠分别口服N-乙基N-亚硝基脲(ENU)、2-乙酰氨基芴(2-AAF)和二甲基酰肼(DMH)3天后，以iRSM方法相应地检测小鼠脾、骨髓和肝组织p53基因第6内含子区域的Apa→Ava位点反向突变。结果表明ENU诱发肝组织p53基因突变的发生率为33%，2-AAF使肝组织突变的发生率为25%，这一阳性突变率反映出了不同诱变剂对相应组织的致突变强度，进一步验证了该方法的高灵敏度和准确性。它具有灵敏度高、快速、操作简便、以及突变检测部位明确等优点，应当说是一种较具实用价值和生命力的突变检测手段。但是，iRSM的不足之处是仅能检测诱发限制性酶切位点反向的DNA突变。根据文献资料分析，化合物致突的发生具有一定的规律性，即结构类似的一组化合物常常引起一些特定序列较固定的碱基改变。例如，烷化剂和芳香胺类虽易使一连串鸟嘌呤(G)3′端G发生突变，这可能与该部位电荷密集有关，多数活性氧生成物质的DNA致突作用也具有类似规律；CpG二核苷常常是DNA加成物致突变作用部位，所以CpG突变的检测在化合物致突检测中具有重要意义，而CpG突变常引发某些固定酶切位点的变化。很显然，iRSM可较广泛地应用于遗传毒性化合物致突作用的检测。