发布时间:2024-08-20 11:28 原文链接: 关于鞭毛染色法—硝酸银法的基本介绍

  鞭毛染色法—硝酸银法的染色操作:

  一、选用洁净载玻片。

  二、配制染料,A液为丹宁酸5g,FeCI3 1.58,蒸馏水100ml,待溶解后,加1% NaOH 1ml和15%甲醛2ml。B液为AgNO32g,蒸馏水100ml。待AgNO3溶解后,取出10ml作回滴用,即向90ml B液中滴加浓氢氧化铵溶液,当出现大量沉淀时再继续滴加,直至溶液中沉淀刚消失变澄清止。然后用保留的10ml B液小心地逐滴加入,至出现轻微和稳定的薄雾为止(此操作重要!)。在整个滴加过程中要边滴边充分摇荡。配好的染色液当日有效,4h内效果最好;

  三、菌液制备及涂片,取普通变形杆菌(Phote。oulgaris)等运动力强的菌种,在合适培养基上连续移种几代,然后取用幼龄菌体制成悬液,在37℃温箱放置10min,使鞭毛松开。挑取悬液于玻片一端,倾斜玻片,使菌液慢慢流向另一端,用吸水纸吸取多余菌液后,气干;

  四、染色,先滴A液,染4~6min后用蒸馏水充分洗净,再滴B液,在微火上加热0.5~1 min(不使干涸),最后用蒸馏水洗后自然干燥;

  五、用油镜观察。结果菌体与鞭毛均呈深褐至黑色。