透射光成像时可根据细胞形态对细胞进行分割

透射光成像功能对于基于细胞学检测的试验非常具有吸引力,原因在于其无需标记,且仅需要较短的曝光时间,不同时间点都可以检测且对细胞无损伤。然而,在透射光条件下对许多连接紧密的细胞进行分割是一个非常大的挑战,因为细胞与背景的对比度很低,这样就需要软件具有强大的逻辑运算能力。这里,我们介绍具有ZL的无标记细胞检测技术,通过仪器的学习能力简化图像的分析设置,它可以适用于很多不同种类的细胞。

 

 

基于细胞学检测试验

细胞增殖/毒性,通过癌细胞(HeLa)增殖情况来评价抗癌药物的疗效

透射光条件下的无标记细胞计数功能,进行细胞增殖试验可在不同时间点获得结果。使得可以选择不同时间点记录抗增殖药物或者生长因子对细胞的作用效果,绘出浓度效应学曲线并给出IC50s值,而且重要的是整个过程不需要染细胞进行观察,试验过程并不会影响细胞正常变化。

 

 

使用ipsc(诱导多功能干细胞)分化的肝细胞进行肝细胞毒性分析试验

 

 

肝细胞毒性分析试验使用诱导多功能干细胞(ipsc)分化的肝细胞作为研究对象。使用若干种肝毒性药物对这些细胞处理72小时后,我们使用Calecin或者鬼笔环肽偶联的AF-488评价细胞的活力,毒性检测的评价方法可以根据细胞区域面积变化或细胞数目的变化,黄曲霉毒素、十字袍碱、依托泊苷和其他肝毒性化合物的IC50s值的确定,检测试验的窗口大约为200,Z值>0.9。

 

 

造血干细胞分化&毒性

我们设计出一个非常适合检测生长因子和抗癌药物对造血作用影响的试验,我们将造血干细胞中加入不同的生长因子进行培养,此外,可以用来评价几种抗癌药物的作用效果,使用标记有FITC细胞系特异性的抗体进行染色或者使用细胞示踪绿色染料(Cell Tracker Green)。可以用于检测许多表达谱系特异性标记物的细胞或全部细胞数目,IC50s由不同因素所决定。试验窗口(assay window)>100,Z值>0.7。

 

 

·         不同的细胞因子组合对CD34+细胞培养情况影响

·         使用细胞示踪绿色染料(Cell Tracker Green)(针对全部细胞进行计数)或A型血糖蛋白(标记红色祖细胞)

 

 

·         CD34+细胞培养时加入促红细胞生成素(EPO)和抗癌药物

·         细胞计数(扩增/毒性)