冷冻蚀刻(Freeze-etching)电镜技术是从50年代开始发展起来的一种将断裂和复型相结合的制备透射电镜样品技术,亦称冷冻断裂(Freeze-fracture)或冷冻复型(Freeze-replica),用于细胞生物学等领域的显微结构研究。
冷冻蚀刻电镜的优点:①样品通过冷冻,可使其微细结构接近于活体状态;②样品经冷冻断裂蚀刻后,能够观察到不同劈裂面的微细结构,进而可研究细胞内的膜性结构及内含物结构;③冷冻蚀刻的样品,经铂、碳喷镀而制备的复型膜,具有很强的立体感且能耐受电子束轰击和长期保存。
缺点:冷冻也可造成样品的人为损伤;断裂面多产生在样品结构最脆弱的部位,无法有目的地选择。
目前,冷冻蚀刻装置的型号很多,但主要分为两种类型:一种是专用冷冻蚀刻装置,如EIKO公司生产的FD-2A型、FD-3型,BALZERS公司生产的BAF300型;另一种是真空喷镀仪的冷冻蚀刻附件,如日立公司生产的HFZ-1型,它与FE-1型加温蚀刻装置一起安装在HUS-5型真空喷镀仪中使用。以上两种类型各有优缺点,专用装置优点在于操作方便,能连续制样,效率高。缺点是价格贵;附件装置价格虽便宜,但不能连续操作,效率低。利用冷冻蚀刻电镜技术观察到的红细胞如图2.3所示。
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