刘丽宏主任：洞悉世界先进理念，开展应用型药学研究

　　2013年12月8日，第四十期质谱沙龙活动在北京朝阳医院顺利举办，来自北京师范大学、北京朝阳医院、中科院微生物所、空军总医院的百余名专家学者齐聚一堂共同参加了此次沙龙活动。

北京朝阳医院总药剂师药事部主任 刘丽宏

　　活动期间来自北京朝阳医院总药剂师，药事部主任刘丽宏做了题为《一台质谱带来的改革》的报告，主要讲解了应用型医药学的研究。

一路走来的发展历程及成就

　　刘丽宏主任说其实验室在2006年6月，获得新药Ⅰ期临床研究的SFDA批准；在2006-2013年期间，共完成Ⅰ期临床项目29项，发表相关论文共32篇，其中SCI3篇，核心期刊论文29篇。内容包括药代动力学研究，生物等效性试验，耐受性试验，Ⅰ期分析测试。

　　刘丽宏主任表示在新药Ⅰ期研究中，积累了团队和技术，并应用于国家项目的申请。在Ⅰ期的拓展研究中，已经拿到两项国家重大西药创制的GCP平台：有军事医学背景的低剂量辐射防治药物防治药物临床综合评价平台规范化建设与创新评价体系研究，和为医院申请到的具有先进技术特色的呼吸病GCP平台体系建设。这些成就是对前期工作的肯定，也是对之后工作的促进。

开展临床特色项目：治疗药物监测，遗传代谢病筛查，体内毒物定性定量筛查

　　治疗药物监测-FK506，环孢菌素，合并用药

　　 在他克莫司胶囊中国健康成年志愿者生物等效性实验研究中，检测方法费用高，灵敏度低，血药浓度个体差异大，CYP3A5基因多态性影响FK506代谢。基于此，刘丽宏主任开始建立FK506质谱检测方法，并开发FK506质谱检测试剂盒，这是SFDA批准的第一个他克莫司的LC-MS/MS检测试剂盒，是全国第二个获批的LC-MS/MS试剂盒产品。在朝阳医院，质谱方法与以往方法相比，每年节省试剂盒成本200余万。刘丽宏主任还建立了FK506代谢酶基因型检测方法，并参加探索中国人肾移植患者FK506计量标准范围。

　　环孢菌素方面，前处理是用蛋白质沉淀法；分析方法选用LC-MS/MS。该方法的特点是：前处理简单，灵敏度高，与TDx法线性相关度好。朝阳医院每年完成临床样本量5000余例。

　　合并用药方面，文献报道了免疫抑制剂及其合并用药的LC-MS/MS定量方法（12种）。

　　体内毒物定性定量分析

　　中毒药物多目标快速筛查与定量，可以同时快速分析300种化合物，分析时间小于两小时，MRM定量专属性强，自动谱图查询未知毒物。在中毒药物快速筛查方面，刘丽宏主任的实验室是全国首家基于质谱技术的中毒检测中心，已完成临床样本六百余例，成功挽救百余位中毒患者生命，并且是某国际多中心临床研究项目中国区唯一判定不良反应中心实验室。

　　 体内小分子分析-全谱氨基酸检测，新生儿遗传代谢病筛查

　　氨基酸代谢障碍所引起的疾病约为100多种，通过引进iTRAQ试剂，LC-MS/MS高通平台建立了全谱氨基酸检测方法，该质谱方法的特点是：多目标，42种氨基酸同时定量；高通量，每样本检测时间仅为25分钟；区分同分异构体，每种氨基酸独立内标；复杂样本，血液、土壤、尿液、脑脊液。全谱氨基酸检测拓展主要有两方面，产品质量控制和氨基酸准确评估。

　　新生儿遗传代谢病筛查临床意义在于，对新生儿40多种遗传代谢病进行诊断和筛查，在未出现临床症状时，进行及时有效的治疗，从而保障儿童正常的体格发育和智能发育。2004年SFDA专门制定了“用串联质谱法分析新生儿氨基酸游离肉毒碱和酰基肉碱筛选检测系统”的指导性文件。2009年，朝阳医院建立新生儿遗传代谢病筛查LC-MS/MS检测方法。

　　在临床服务上，刘丽宏主任共申请ZL3项：公审：一种高灵敏度全血他克莫司检测试剂盒及其制备；实审：30种氨基酸同时定量检测方法及试剂盒制备；实审：一种高灵敏度全血环孢素A定量检测试剂盒及其制备。发表文章17篇，其中SCI2篇，核心期刊论文15篇。

药学研究——立足临床，开拓科研新思路

　　刘丽宏主任介绍了全军重点科研课题：导弹推进剂中毒水平的筛查方法及应用研究。通过建立高通量、多目标、快速的质谱检测法，监测毒物水平、临床病症，建立相关性数据库，来寻找中毒早期筛查目标，确定推进剂中毒诊断标准，从而确定推进剂污染中毒早期损伤诊断的新标准。通过对质谱参数优化，色谱条件摸索，前处理方法摸索，内标的选择，方法学验证，大鼠血浆样本应用，以及临床样本应用，建立了肼类体内定量方法，硝铵类体内定量方法。刘丽宏主任说，这是国内首次建立肼类推进剂体内定量分析。

　　刘丽宏主任说，全军科研重点课题拓展方面，肼类推进剂肝脏毒性大和LC-MS/MS高通量平台结合代谢组学研究（寻找肝损伤生物标志物）获得国家自然科学基金。2013年又获批了一项国自然课题，发表文章6篇。

质谱沙龙-自由、活跃、高层次的交流平台

　　刘丽宏主任表示所有的研究，都需要交流，需要一个平台，而质谱沙龙正是提供了这么一个平台。2007年9月建立的质谱沙龙交流平台由北京朝阳医院，AB SCIEX公司主办，由北京艾米洛医学研究有限公司，分析测试百科网，默沙东制药有限公司协办，由15家医院， 12家高校， 7所研究所， 8家机关单位， 3家媒体， 17家公司参加。质谱沙龙的宗旨是无偿公益，2007年9月至今已经成功举办40期，2013年开展北京市继续教育项目。 质谱沙龙的内容包括专题报告，自由交流，户外拓展。质谱沙龙的交流方向包括临床服务，新药Ⅰ期临床研究，药学科研，新思路。

　　对于未来，刘丽宏教授说，发展方向包括1.科研方面：Ⅰ期药物临床试验，先进技术特色的GCP平台，代谢组学研究，0期探索研究，定量药理学；2.应用方面：治疗药物监测，中毒筛查，体内小分子分析，维生素D和类固醇类分析。

　　刘丽宏主任最后表示，希望将来有更多的机会把质谱技术更好地应用于临床。

　　更多第四十期质谱沙龙文章参见：

　　第四十期质谱沙龙活动顺利召开

　　何大澄教授：蛋白质组学已经成为细胞生物学的基础

　　魏敏吉教授：临床药代动力学研究中的技术方法思考

　　刘丽宏主任：洞悉世界先进理念，开展应用型药学研究

　　贺玖明副研究员：质谱成像技术的新发展

　　罗元明副研究员：生物质谱与蛋白翻译后修饰研究方法学

　　李敬来博士：药代发现早期系列化合物的药代特性快速评价

　　李春波博士：差异蛋白质组学研究的利器

　　更多质谱沙龙活动报道请浏览：http://www.antpedia.com/special/1542-bid-177-zid.html