实验方法原理 细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点,在分化程度较高的细胞更为明显,这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如:具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形;具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起;游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。
实验材料 蟾蜍人血
试剂、试剂盒 甲苯胺兰甲基兰Ringer氏液
仪器、耗材 显微镜载玻片盖玻片手术器材解剖盘镜台测微尺
实验步骤
1. 制备蟾蜍脊髓压片观察脊髓前角运动神经细胞。
(1)取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓,在口裂处剪去头部,除去延脑,剪开椎管,可见乳白色脊髓,取下脊髓放在平皿内,用Ringer氏液洗去血液后放在载片上,剪碎。
(2)将另一载片压在脊髓碎块上,用力挤压。
(3)将上面的载片取下即可得到压片。
(4)在压片上滴一滴甲苯胺兰染液,染色10分钟,盖上盖片,吸去多余染液。
(5)在显微镜下观察,染色较深的小细胞是神经胶质细胞。
(6)染成兰紫色的、大的、有多个突起的细胞是脊髓前角运动神经细胞,胞体呈三角形或星形,中央有一个圆形细胞核,内有一个核仁。
2. 蟾蜍骨骼肌细胞的剥离与观察
(1)剪开蟾蜍腿部皮肤,剪下一小块肌肉,放在载片上。
(2)用镊子和解剖针剥离肌肉块成为肌束,继续剥离,可得到很细的肌纤维(肌细胞)。
(3)尽可能拉直肌纤维。
(4)在显微镜下观察,肌细胞为细长形,可见折光不同的横纹,每个肌细胞有多个核,分布于细胞的周边。
3. 蟾蜍肝脏压片的制备与观察
(1)剪开蟾蜍腹腔,取一小块(约2~3 mm3)肝放在平皿内,用Ringer氏液洗净,用镊子轻压将肝中的血挤出。
(2)然后放在载片上,制片方法同脊髓压片。
(3)染色用甲基兰,显微镜下观察可见肝细胞核染成兰色,肝细胞紧密排列,挤成多角形。
4. 蟾蜍血涂片的制备与观察
(1)取一滴蟾蜍血液,靠近一端滴在载片上。
(2)将另一载片的一端呈45°角紧贴在血滴的前缘,均匀用力向前推,使血液在载片上形成均匀的薄层,晾干。
(3)显微镜观察可见蟾蜍红细胞为椭球形,有核。
(4)白细胞数目少,为圆形。
5. 人血涂片的制备与观察
(1)取人血一滴,制片方法同上。
(2)显微镜观察可见人红细胞为凹圆盘形,无核。
(3)自细胞数目少,为圆形。
6. 人口腔上皮细胞标本的制备与观察
(1)用牙签刮取口腔上皮细胞均匀地涂在载片上(不可反复涂沫)。
(2)滴一滴甲苯胺兰染液,染色5分钟,盖上盖片,吸去多余染液。
(3)显微镜下观察可见复盖口腔表面的上皮细胞为扁平椭圆形,中央有椭圆形核,染成兰色。
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