化妆品中甲醇含量的测定方法

方法提要
试样直接或经蒸馏后，以气相色谱法进行测试和定量（2）。
2 样品采集
3 试剂
3.1 甲醇（99.5％）：分析纯。
3.2 无甲醇乙醇：取1.0?l注入色谱仪，应无杂峰出现。
3.3 GDX－102（60～80目）：气相色谱试剂。（3）
3.4 甲醇标准溶液：取甲醇2.5ml，置于预先注入95ml水的100ml容量瓶中，然后加水至刻度，混匀备用。此溶液为2.5％甲醇溶液。
3.5 氯化钠：分析纯。
3.6 消泡剂：乳化硅油。如284PS，上海树脂厂出品（4）。
4 仪器
4.1 气相色谱仪：具氢火焰离子化检测器（5）。
4.2 色谱柱：玻璃柱或不锈钢柱，规格2m×Ø4mm，内填充GDX－102（60～80目）担体（6）。
4.3 全玻璃磨口水蒸馏装置：
4.4 微量进样器：0.5?L或1?L。
5 分析步骤
5.1 启动色谱仪，进行必要的调节，以达到仪器zui佳工作条件。
色谱条件依具体情况选择，参考条件为：
气化温度：190℃。
检测器温度：180℃。
柱温：170℃。
氮气流速：40ml/min。
氢气流速：40ml/min。
空气流速：500ml/min。
进样量：1?l。
5.2
样品预处理：液体或低粘度样品，且甲醇含量较高时，可取10ml试样，加无甲醇乙醇（3.2）至总体积为50ml，必要时可过滤，作为样液备用。甲醇含量低的花露水等，也可不经稀释直接测定。样品粘度较大，无法直接测定，可以取10g试样，置于蒸馏瓶中（如图），加50ml水、2g氯化钠（3.5）、必要时加1滴消泡剂（3.6），再加30ml无甲醇乙醇（3.2），在沸水浴中蒸馏，收集约40ml蒸馏液于50ml容量瓶中，冷至室温后，加无甲醇乙醇（3.2）至刻度，作为样液（7）。
5.3 测定
取50ml容量瓶四只，分别注入1.00、2.00、3.00、4.00ml甲醇标准溶液（3.4），然后分别加入无甲醇乙醇30ml，并分别加水至刻，此标准序列含甲醇为：0.05％、0.10％、0.15％、0.20％。
依次从各容量瓶取1?L标准注入气相色谱仪，记下各次色谱面积，并绘制峰面积－甲醇浓度（V/V）曲线。
取5.2制备的样液1?L,注入气相色谱仪,记录色谱峰面积,并从标准曲线查出对应的甲醇浓度（8）。
6 分析结果的计算
按下式计算甲醇浓度：
甲醇（％，V/V）＝P/K
式中：P───从标准曲线上查得样液甲醇浓度，％；
K───样品稀释系数，如按本方法稀释系数为10/50样品经蒸馏处理时，也视稀释系数为10/50。
附加说明：
本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所归口。
本标准由“化妆品卫生化学标准检验方法”起草小组负责起草。
本标准主要起草人沈文、郑星泉、陈辰。
本标准由中国预防医学科学院环境卫生监测所负责解释。
注解：
（1）甲醇（又名木醇或木酒精）主要经呼吸道和胃肠道吸收，皮肤也可部分吸收。甲醇吸收至体内后，可迅速分布在机体各组织内，其中以脑髓液、血、胆汁和尿中含量zui高
，眼房水和玻璃体中的含量也较高，骨髓和脂肪中zui低。甲醇有时显的蓄积作用，未被氧化的甲醇经呼吸道和肾脏排出体外，部分经胃肠道缓慢排出。甲醇在体内主要被醇去氢酶（debynogenase）氧化，其氧化速度是乙醇的1/7，zui后代谢产生为甲醛和甲酸。近年研究表明，甲醇在体内抑制某些氧化醇系统，抑制糖的需氧分解，造成乳酸和其它有机酸积累，从而引起酸中毒。
甲醇主要作用于中枢神经系统，具有明显遥麻醉作用，可引起脑水肿，对视神经及视网膜有特殊选择作用，引起视神经萎缩，导致双目失明。
甲醇的皮肤吸收采用猴子等进行研究，推测人吸收30ml甲醇有危险。急性毒性：
LD50（口服） 人：1400mg/kg
LD50（吸入） 人：4000ml/L
因为甲醇毒性较强，故化妆品卫生标准（GB7916－87）规定甲醇为禁用物质。化妆品中含有的甲醇杂质含量不得大于0.2%（V/V）。
（2）检验化妆品中甲醇的方法有气相色谱和分光光度法。前者准确、快速、灵敏度高，是方法。
（3）GDX-高分子多孔微球是一种人工合成的新型固定相，还可以作为担体涂渍固定液。它由苯乙烯（STY）和二乙烯苯（DVB）或乙基乙烯苯（EST）与二烯苯聚合而成。聚合物若为非极性（STY）与极性基团的化合物聚合，则形成极性聚合物。其优点是：
（a）具有较大的比表面却无吸附活性中心。因而极性组分也能获得正态峰。
（b）无流失现象，柱寿命长。
（c）对强极性化合物（醇、酮等）有较好的分离能力，并且有较强疏水性能，特别适用于分析混合物中微量水分。
（d）具有耐腐蚀性，可用于有腐蚀性的样品分析；但不能分析二氧化氮，因与其反应，使固定相变质。
（e）热稳定性好。zui高使用温度200～300℃。
（f）具有吸附、分配及分子筛三种作用，因而分离能力好。
（g）柱过负荷后，恢复快，不适用于制备色谱。
（4）消泡剂种类很多，此处所用系硅高分子化合物，乳化硅油284PS是甲基乙氧基硅烷（30～33％）与硅脂、聚乙烯醇加水至100的混合物。适合于含水样品的消泡。净化的248PS，其色谱图在甲醇保留时间范围内没有杂峰。
（5）氢火焰离子化检测器（FID），具有灵敏度高、死体积小、应答时间快、定量线性范围宽、结构简单、操作稳定、对温度不灵敏、不需要置于控制温度的恒温箱中等特点。由于它灵敏度高，对载气的纯度要求也较高，对*性气体、水、甲酸、甲醛、二硫化碳等无应答。在使用（FID）检测器时应注意：
（a）载气、氢气和空气必须很好净化。
（b）为了使离子化讯号不受载气或氢气流速的影响，应从实验中找出适当的流速，一般流速比为：载气+氢气=1+1或1+2，本方法氮气流速+氢气流速=40ml/min+40ml/min。一般空气流速与氧气流速是10+1，这样可使信号不随流速而改变。本方法空气流速是500ml/min。
（c）要经常保持离子头清洁。
（d）要注意尽可能采用低蒸气压的固定液，防止固定液的流失引起基底电流和噪音的增大。
（e）样品取量不能太多，特别是其中水分不能太多，否则会使温度下降，影响灵敏度，有时甚至使火焰熄灭。
（f）屏蔽绝缘要好。
（g）要保持离子化室在适当温度，保持空气流速相当大，使燃烧生成的水有致冷凝并且及时排出。
（6）因为高分子多孔微球在空气中加热易变质，所以只能在装柱后通载气（N2、H2等）进行动态老化至基线平直。另外高分子多孔微球易产生静电而影响装柱，装柱器具需用经丙酮或乙醇润湿的纱布擦拭。装柱方法同气-液填充柱。
（7）从目前国内产品分析来看，绝大部分样品无需蒸馏，可以直接进样。至于是否稀释则需从含量来考虑。样品结果应在标准曲线覆盖范围之内。10g样品一般加20ml水，粘度太大的样品可加50ml。但含乙醇低于50%的样品，可以少加一点（如20ml）。此处加氯化钠是为电解质破乳，并且使水相中含无机盐，以利用甲醇蒸出。
（8）甲醇标准溶液0.05％、0.1％、0.15％、O.2％在103型GDX柱可以得到相应的mV数为0.85、1.50、2.34、2.98，保留时间约为40～100s。线性关系良好，此法回收率在95％以上，相对标准偏差在5％以下。