在化学键合相色谱仪分离分析工作中，C18色谱柱的操作使用与保养是否得当，直接影响色谱柱的寿命。
一、装卸和更换柱子时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。
二、用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多时，应为每一类常规分析配置一根专用柱，以延长柱子的寿命。
三、使用柱温控制时，应注意在通入流动相后才能升温。
四、流动相使用前需进行脱气处理，以免降低柱效和影响检测等。样品溶液需经适当的前处理和过滤，以减少柱污染和堵塞。
五、更换流动相种类时，应注意溶剂的互溶性，防止发生盐析现象。
六、柱子的实际操作压力应低于填装时的zui高压力，zui好在zui高压力的一半以下。
七、C18色谱柱属于非极性键合相色谱柱，流动相的PH值应严格控制在2～7之间，以免损坏柱子。
八、完成分离分析工作后，不应立即停机，需及时对色谱分析系统进行冲洗，以除去柱内杂质。
九、如果流动相中有盐类，首先用水充分清洗。如果是胺类（如三甲胺类和四丁基胺类）添加到流动相中，要用50%甲醇和0.05%磷酸溶液混合溶剂冲洗，不要只用水冲洗。
十、柱子一般用100%甲醇作为保存溶剂，以防柱子干裂而损坏。严禁水或缓冲溶液长时间在色谱流路中保留。
十一、选用合适的C18保护柱，以保护分析柱免受杂质颗粒和不可逆吸附干扰物的影响。保护柱内填料的颗粒度应与分析柱内填料的颗粒度尽量一致。
十二、柱子的保存期不宜太长。
1、短期不用的柱子，用甲醇冲洗30～60min，然后将柱两端密封。
2、较长期不用的柱子，方法一是定期冲洗，再密封；方法二是冲洗后，柱子两端各装一只有一定容量的灌满甲醇的容器（只装一端也可），以补充在较长存放期柱内溶剂的蒸发。