化学键合相色谱仪C18色谱柱的维修包括柱污染再生、柱污染的修复和柱塌陷的修复等。
一、柱污染再生:
色谱柱污染后,可以用合适的溶剂冲洗,使柱效再生。
C18柱常规的再生方法:
1、分别用甲醇、甲醇和水各60mL依次通过色谱柱,再用100%甲醇60mL平衡色谱柱后封存,柱效将恢复正常。必要时,根据柱污染性质(如有机污染和盐类污染等),采用0.05mol/L H2SO4、0.5mol/L H3PO4或0.1mol/L EDTA钠盐冲洗,然后用水冲洗,zui后用100%甲醇平衡色谱柱后封存。
2、对于严重污染的C18柱,可采用水、甲醇和乙烷依次冲洗后,按倒过来的顺序再冲洗一次,每次用溶剂60mL,不接检测器,zui后用100%甲醇平衡色谱柱封存。
二、柱污染的修复:
柱污染再生无效或已知柱污染严重时,可以采用柱修补的方法解决,但柱污染深度不宜超过5mm。
方法是用特制小铲将污染部分挖去,再用与柱填料相同的固定相和流动相混合制成浆状,然后将浆状固定相仔细补入被挖去的部分,尽量使后填补的固定相接近原装的紧密程度,修平端面即可。如果修好的柱子两端的筛板的孔径是一致的,可将柱子颠倒过来使用一般时间,目的是借助流动相的冲洗作用,恢复柱床紧密程度。
三、柱塌陷的修复:
柱塌陷不太严重时,如果柱子两端的筛板孔径是一致的,可将柱子颠倒使用一般时间,即可恢复性能。当塌陷严重(5mm左右)时,可采用柱污染的修复方法修补。