基本方案
| 实验方法原理 | |
|---|---|
| 实验材料 | 脐血 |
| 试剂、试剂盒 | 灭菌合适的培养基或冷冻液 PBSA |
| 仪器、耗材 | Ficoll-Hypague(密度1.077g L)巴氏吸管 50mL离心管 |
| 实验步骤 |
(a) 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释。 (b) 将15mLFicoll-Hypague吸入50mL离心管。 (c) 将30mLPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到Ficoll-Hypague上。 (d) 室温450g离心20〜30min。 (e) 离心后，在Ficoll-Hypague液面上明显可见一层细胞，是密度低于FicoIlHypague液的单个核细胞层。 (f) 用巴氏吸管，将单个核细胞层吸出，转移到另一离心管中。 (g) 用PBSA洗细胞，室温200g离心10min。 (h) 倒掉上清，用PBSA重悬细胞，洗细胞，重复上述步骤（g)。 (i) 最后，用合适的培养基重悬细胞（冰冻液或培养基）
展开 |