实验材料 杂交瘤
试剂、试剂盒 完全培养基
仪器、耗材 培养箱转子离心机
实验步骤
1. 将杂文瘤置于一个盛有完全DMEM-10培养基的175 cm2组织培养瓶中，置37 ℃CO2培养箱中，直至生长旺盛适于分传。
2. 按1：10的比例将细胞分传到一个新的175 cm2的培养瓶中，加入完全DMEM-10培养液到总液量为100 ml，并置CO2培养箱中直至细胞过度生长，此时溶液变酸（变黄色），细胞死亡（约5天）。
3. 将培养瓶中的内容物转移到无菌的50 ml 的锥形离心管中，室温下1 500 g 离心10 min，收集上清，弃沉淀。
4. 用ELISA法或用流式细胞仪检测MAb上清的滴度。
5. 将上清无菌保存，在4℃时通常可稳定地存放数周至数月；在-20℃时可存放数月至数年；-70℃时可永久保存。分装成数份冻存，尽量避免反复冻融。