厌氧培养箱安装方法

1. 厌氧培养箱应安放在温差较小、操作方便的位置，应避免阳光直晒和远离采暖设备，放置平稳；
2. 将混合气瓶、氮气瓶安放平稳，并分别装好减压阀（含压力表），安置在适当位置；
3. 接上气路并检查气路，为防止漏气，必要时可在各接管处用密封胶粘合；

使用
（一）操作室厌氧环境形成：
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室内放入二个无毒塑料袋；
2. 通电源开照明灯，开温控仪，调节所需温度及安全温度；
3. 操作室内放入1000g钯粒（封闭）和500g干燥剂，并放入美兰指示剂（封闭）；
4. 关紧取样室内外门，并抽真空校验；
5. 操作室内第一次置换（氮气置换）：
  A. 先用橡皮管插入操作室内进气口，另一头插入塑料袋；
  B. 接通氮气进气路，打开氮气控制阀1，使二只塑料袋充足氮气，关闭阀门1，然后扎紧袋口；
  C. 把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧；
  D. 把塑料袋内氮气渐渐放于操作室内，至全部放出。
6. 操作室第二次置换（氮气置换）重复一次充氮过程，取样室先抽真空，并注意随时用脚踏开关开闭排气。
7. 操作室第三次置换（混合气体置换）：（混合气体配比为N2 85%、H2 10%、CO2 5%）
  A. 调换气路打开混合气阀3进气，充气时取样室先抽真空，并随时用脚踏开关开闭排气；
  B. 混合气充满塑料袋后，关掉混合气阀并打开阀5，使混合气经过流量计，调整流量计，流量为每分钟10ml左右；
  C. 把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内；
  D. 通过三次换气后，操作室内气体含氧量已处于极微量状态。
8. 操作室内打开粑粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一小时后开美兰指示剂（美兰安瓶）观察其变色情况，不变色为操作室内达到厌氧环境；
9. 开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理，灭菌时间按具体实验自定。

（二）菌种的置入和培养：
1. 检查取样室内门并关紧之；
2. 打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门；
3. 取样室充氮置换三次过程：打开真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打开氮气阀2进气，使指针回复零位，关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打开阀4进混合气，使指针回复零位，后掉阀4。取样室充氮置换三次过程结束；
4. 如选定真空度较低就需要增加置换的次数；
5. 取样室内外门开启、关紧，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）检验；
6. 厌氧培养箱需要长期连续使用的条件：
  A. 每天在操作室内打开美兰指示剂观察，如不正常就必须重新换气；
  B. 要长期连续输入微量的混合气体，使补进的氮气能和微量的氧结合通过催化吸收，保证室内厌氧状态，补入混合气流量选定为每分钟10ml左右；
  C. 连续培养运行一天，更换一次除氧剂和干燥剂。
7. 操作室内培养室内室温度可任意选择和控制。
8. 混合气瓶、氮气瓶输出压力调整：调节减压阀，使输出压力0.1Mpa左右。

注意事项
1. 仪器尽可能地安装于空气清净、温度变化较小的地方；
2. 开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的使用说明，掌握正确使用方法；
3. 培养物放入必须是在操作室内达到绝对厌氧环境后放入；
4. 如发生故障（停气等原因）操作室内仍可保持12小时厌氧状态（超过12小时则根据需要把培养物取出另作处理）；
5. 经常注意气路有无漏气现象；
6. 调换气瓶时，注意要扎紧气管，避免流入含氧气体；
7. 真空泵按要求使用，定期检查加油。