发布时间:2021-05-28 20:13 原文链接: 原代细胞实验中样本的处理方法

原代细胞实验中样本的处理方法
1. 血清:全血标本于室温放置2小时或4℃后于1000×g离心20分钟,取上清即可检查,搜集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。  
2. 血浆:抗凝剂举荐运用EDTA.Na2,标本搜集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检查。防止运用溶血,高血脂标本。  
3. 安排匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲刷安排,以去掉残留血液(匀浆中裂解的红细胞 会影响测量效果),称重后将安排剪碎。将剪碎的安排与对应体积的PBS(一般按1:9的分量体积比,比方1g的安排样本对应9mL的PBS,详细体积可依据试验需求恰当调整,并做好记载。举荐在PBS中参加蛋白酶抑制剂)参加玻璃匀浆器中,于冰上充沛研磨。为了进一步裂解安排细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或重复冻融。zui终将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检查。  
4. 细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除掉杂质及细胞碎片。取上清检查。 
5. 其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检查
6. 标本应清澈通明,悬浮物应离心去掉。  
7. 标本搜集后若不及时检查,请按一次运用量分装,冻存于-20℃/-80℃冰箱内,防止重复冻融, 1-6月内检查,4℃保留的应在1周内进行检查。   
8. 如果您的样本中检查物浓度高于标准品zui高值,请依据实际情况,做恰当倍数稀释(主张先做 预试验,以判定稀释倍数)。

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