实验方法原理
| 在生活细胞内，原生质的活跃运动现象统称为原生质运动。原生质运动是生活细胞的重要标志之一。原生质可以在细胞内流动，也可以通过胞间连丝穿流于细胞与组织之间，有时并非全部原生质都参与运动而仅限于局部细胞质，往往原生质表面的透明层（Hyaloplasm）处于静止状态。 原生质运动在所有生活细胞中均可见，但往往在某些特定材料中表现得特别明显。有时由于在制片时对材料的机械损伤，也会引起原生质发生强烈的运动。 原生质运动是生活体消耗能量而做功的生理过程，它与植物体内的物质运输及分配以及多种酶促反应密切联系。原生质运动有各种形式，一般将原生质运动归为两类，凡并非因外界环境的改变而引起的原生质运动，称为自发性的原生质运动；由于某种外界原因而引起的原生质运动称为诱发性的原生质运动。 本实验使用光学显微镜观察几种植物细胞原生质的运动现象；测定原生质运动的速度及观察呼吸抑制剂2，4－二硝基酚（DNP）对原生质运动的影响。 | |
| 实验步骤 | 材料和设备 黑藻、轮藻、小麦幼苗（种子萌发2－3天根长1－2 cm ）、紫鸭趾草（正在开花的）、洋葱鳞茎（未萌发的紫皮鳞茎）、南瓜叶片表皮毛或茎部表皮毛、粘菌的原生质团、显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、镊子、剪刀、纱布、擦镜纸、目镜测微尺、台尺、秒表、滤纸。 5×10－4 M 的2，4－二硝基苯酚溶液 实验步骤 1．观察几种植物细胞的原生质运动现象。 （1）黑藻叶片的观察：用镊子取下黑藻幼嫩叶片放于载玻片上，滴加清水并盖上盖玻片，在显微镜下观察，寻找沿叶片中脉的部分，细胞中叶绿体随原生质沿胞壁移动（若室温低于20℃或阴天看不见原生质运动现象时，可用强光照射15－20 分钟后再观察）。注意整个叶片中哪些部分原生质流动得最快，相邻两细胞中流动方向有何不同。 （2）轮藻节间细胞的观察，取一株粘藻（含有两个以上的节）节间，用水洗净后置于载玻片上，加盖玻片于显微镜下观察，由于轮藻节间外面常有沉积物附着不易看清，因此可先在低倍物镜下移动载玻片，找到合适的部分后再换高倍物镜观察，细胞中排列整齐的叶绿体并不移动，而原生质透明部分夹带着大小颗粒一起流动，小心地调动细螺旋仔细观察。 （3）小麦根毛的观察：将小麦根剪下放在载玻片上，加盖玻片在低倍镜下找到根尖以上的根毛区，然后在高倍镜下进行镜检，可以看到透明原生质夹带一些颗粒沿根毛细胞壁流动，注意根毛尖端和基部原生质流动方向的变化。 （4）紫鸭跖草雄蕊毛的观察：将正在开放或即将要开的紫鸭跖草的花剥开，用镊子取下几根雄蕊毛，在显微镜下观察，可见细胞内的原生质以不固定的方向流动。 （5）洋葱鳞茎内表皮的观察：用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮，在显微镜下观察，可看到细胞中原生质的运动。 （6）轻轻取下南瓜叶片表皮或茎部表皮，置于载玻片上，滴上清水后盖上盖玻片，于镜下进行镜检，可见原生质丝纵横交错地包在表面，原生质的运动可以其中小颗粒的位移作为指标。仔细观察原生质的运动方向及其通过胞间连丝穿流于细胞的情况。 （7）观察萌发的花粉管，可见原生质在花粉管中的环流现象。 2．测定原生质运动的速度 可以原生质中某些颗粒的移动速度作指标来测定原生质的运动速度。但原生质颗粒大小不一，它的移动速度亦异，因此应尽量选用较小的颗粒，进行多次测定，求出平均值。 先将目镜测微尺装入目镜，将台尺（一小格相当于0.1 mm即10 μm）置于载物台上，求出目镜测微尺每格相当于多少毫米（或微米），移去台尺。将植物材料放在显微镜下用同一物镜观察。转动目镜，使其中的测微尺与原生质的流动方向平行，用秒表求出每走若干格（视植物材料而定）所需的时间，测10－20次求出平均值。 3．呼吸抑制剂DNP（2，4─二硝基酚）对原生质运动的影响 原生质运动需要消耗能量，这要靠呼吸作用来提供。DNP能抑制呼吸过程中磷酸化过程，因而也就抑制了原生质运动。 反复将5×10－4 M的DNP滴加在载玻片的一端，在另一端用滤纸片吸引，10－20 分钟后，可见原生质流动减缓甚至停止。 |
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