双缩脲试剂由NaOH溶液(0.1g/mL)和CuSO₄溶液(0.01g/mL)配制而成,配制比例为5:1。但是双缩脲试剂不用现配现用,先加入NaoH营造碱性环境,再加入CuSO₄。
双缩脲反应主要涉及肽键,因此受蛋白质特异性影响较小。且使用试剂价廉易得,操作简便,可测定的范围为1~10mg蛋白质,适于精度要求不太高的蛋白质含量的测定,能测出的蛋白质含量须在约0.5mg以上。
双缩脲法的缺点是精确度低、所需样品量大。干扰此测定的物质包括在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。
蛋白质是由氨基酸以“脱水缩合”的方式组成的多肽链经过盘曲折叠形成的具有一定空间结构的物质。蛋白质中一定含有碳、氢、氧、氮元素,常见的蛋白质检测方法很多。蛋白质含量测定是指通过物理或化学方法对蛋白质含量......
摘要:利用双缩脲试剂和分析方法测定大豆乳清废水中乳清蛋白含量,结果表明:①采用酪蛋白为标准物质绘制标准曲线时,分析结果中的蛋白质为碱性可溶性蛋白质,采用代表性很强的样品(已知其蛋白质含量)为标准物质绘......
本方法采用双缩脲试剂与蛋白质分子发生化学反应生成有色物质,适用于各类蛋白质允许测定的蛋白质浓度范围为0.2mg/mL-1.7mg/mL溶液。......