抑制剂存在时，对米氏方程的修正为:
V0=Vmax[S]/(Km+α'[S])
α'=1+[I]/Ki
由上述式知，反竞争性抑制剂会改变酶对底物的Km，km减小，在底物浓度较低时，[S]<<Km，V0=Vmax[S]/Km，反应为关于底物浓度的一级反应;而在底物浓度高时，[S]>>Km，V0=Vmax/α'，减小了反应理论的最大速率Vmax，表现为"酶量减少"。
双倒数作图处理为:
1/v=(Km/Vmax)x(1/{S})+1/vx(1+{I}/Ki)
