磷酸盐缓冲液,Tris缓冲液和柠檬酸缓冲液等是生物学实验中常用的缓冲液,也是PeproTech重组细胞因子和蛋白溶解所需的常用缓冲液。然而,这些缓冲液的配制比较麻烦,尤其当要获得特定pH值的缓冲液时,调节pH值是费力、费时的事情。对于Tris等缓冲液等,pH计是无法准确测量其pH值的。
那么,有没有简便的方法来配制特定浓度和pH值的上述缓冲液呢?
美国PeproTech公司为此精心设计开发出一个网上实用工具--http://www.peprotech-asia.com/convertor/ch/phosphate.html。只要将你所需配置的浓度,pH值,以及配制的体积在网站上相应的位置输入或选定,即可计算出配制该溶液所需各组分的重量或体积,然后称取相应重量或体积的组分即可配制出您所需的缓冲液。
该网上工具包括以下内容:
1) 配制磷酸盐缓冲液
由一定量的Na2HPO4和NaH2PO4混合而得。
2) 配制柠檬酸(盐)缓冲液
由Citric Acid(柠檬酸)和Trisodium Citrate(柠檬酸钠)混合而得。
3) 配制醋酸溶液
在水中加入一定体积的醋酸而得。
4) 配制Tris缓冲液
由一定量的Tris HCl(Tris酸)和Tris Base(Tris碱)混合而得。
5) 重量与摩尔数转换工具
已知一蛋白的分子量(kDa),可由重量推算出摩尔数和分子数,以及在一定体积内摩尔浓度。相反,也可由一个蛋白的摩尔数推算出重量和分子数,以及由摩尔浓度推算出所含的蛋白质量。
附:这些缓冲液在溶解PeproTech公司重组细胞因子和蛋白中的应用举例
1) 磷酸盐缓冲液
1 x PBS用于溶解100-19 Human KGF 和100-52 Human FGF-23等。
2) 柠檬酸(盐)缓冲液
5mM柠檬酸钠(pH 8.0)用于溶解100-17A Human FGF-acidic, 10mM柠檬酸(pH 3.0)用于溶解100-21 Human TGF-b1等。
3) 醋酸溶液
10mM醋酸用于溶解120-10 Human Noggin和120-20 Human WISP-3等。
4) Tris缓冲液
5mM Tris(pH 7.6)用于溶解100-18B Human FGF-basic,10mM Tri(pH 8.0)用于溶解100-25 Human FGF-8。
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