各类（液相色谱法）ＨＰＬＣ的特点及应用

 色谱法（ＨＰＬＣ），zui早是俄国植物学家Ｍ．Ｔｓｗｅｔｔ于１９０６年提出。经典液相色谱法是在常温常压下进行，运行速度慢，柱效低，不能在线检测。ＨＰＬＣ克服了经典液相色谱这一系列缺点，且具有以下优点：分离效率高、分析速度快、灵敏度高、色谱柱可反复使用、流动相可选择范围广、流出组分易分离、均采用计算机控制色谱条件和色谱的处理程序均在线检测等。

  １ 按照功能（用途）分类 ：

  （１）分析型。分析型ＨＰＬＣ主要用于样品的检测以及定性、定量分析。在使用时样品和洗脱液通常废弃，其目的主要是全面获得样品的组成信息。

  （２）制备型。制备型ＨＰＬＣ是基于液相色谱法的各大优点用于样品的分离、富集或纯化。目前，其在中药研究领域中的应用主要有标准品的制备和样品的纯化分离等。

  ２ 按照分离原理分类 ：

  分配色谱（按照固定相和流动相的极性可分为正相分配色谱和反向分配色谱）、吸附色谱、离子交换色谱、离子对色谱、尺寸排阻色谱和胶束色谱等。其中常用的有分配色谱和离子对色谱。      （１）分配色谱。分配色谱中的反向分配色谱是目前在液相色谱法中使用zui为广泛，它占整个ＨＰＬＣ应用的８０％左右。一般用非极性固定相（如Ｃ１８、Ｃ８）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水相溶的有机溶剂调节保留时间。适用于分离非极性和极性较弱的化合物。

 (２）离子对色谱法。常用ＯＤＳ柱，流动相为甲醇-水或乙腈-水，水中加入离子对试剂，在一定的ｐＨ值范围内进行分离。被测组分时间与离子对性质、浓度、流动相组成及其ｐＨ值、离子强度有关。主要用于离子型化合物的分离分析。