吞噬功能实验——人巨噬细胞吞噬功能测定

人巨噬细胞

乙醇瑞士-姬姆萨染色液

离心机培养箱

一、材料准备
 

1.  斑蟊浸液制备：斑蟊以95%乙醇溶液制成10%酊剂，室温下浸泡2周后使用。

2.  人巨噬细胞的获取：取滤纸片蘸斑蟊酊，置于一侧前臂皮肤上，在滤纸片上盖一塑料片，再以清洁纱布固定4~5小时，取下滤纸片，再用塑料瓶盖将局部罩上，以防形成的水疱破裂，48小时即可形成完整的水疱。

二、实验步骤
 

取水疱渗出液0.5 ml，加5%鸡红细胞悬液0.01 ml
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混匀，置37℃水浴30分钟（每10分钟轻轻摇晃一次）

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1000 r/ min 离心5分钟，弃上清，留少许液体混匀细胞，涂片

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用甲醇溶液固定后，用瑞士－姬姆萨染色，油镜观察

1.  细胞涂片要轻，以免推破巨噬细胞。涂片不可过厚或过薄，以免影响观察结果。

2.  斑蟊酊剂皮肤炎性渗出液大多再1 ml，最多的可达6 ml，渗出液中所含巨噬细胞平均为30%~40%，最多可达80%。

3.  抽取水疱液时，将皮肤消毒后，用无菌注射器抽取，盛于无菌试管中；局部敷以无菌纱布，24小时后取下纱布。用此方法病人无痛苦及不良反应。

巨噬细胞是人体重要细胞。 巨噬细胞吞噬功能测定就是测定巨噬细胞吞噬功能。人巨噬细胞可从经斑蝥激发的皮疱液中获取。