固相微萃取高效液相色谱法测定食品中己烯雌酚

固相微萃取高效液相色谱法测定食品中己烯雌酚

摘要: 建立了固相微萃取( SPME) -高效液相色谱( HPLC) 联用测定食品中己烯雌酚( DES) 的方法。考察了萃取纤维头、萃取时间、解吸时间和盐的添加对萃取效果的影响。在此基础上，采用正交试验，以解析液组成、萃取液pH 和搅拌速度为3 因素筛选出了最佳固相微萃取条件。该分析方法的线性范围为0. 02 ～ 2. 0μg /mL，工作曲线线性良好，线性相关系数R = 0. 9961。方法检出限为0. 006μg /mL，测定结果的变异系数小于5%。此方法应用于鸡肉组织和奶粉中己烯雌酚检测，三个加标水平的回收率为81. 9% ～ 93. 1%。

    己烯雌酚( Diethylstilbestrol，简称DES) ，又名为乙烯雌酚、人造求偶素，是一种非甾体类雌激素，在水中几乎不溶。DES 为第一个有活性的口服人工合成激素，于1938 年由Charle Dodd 首次人工合成。DES 几乎具有天然雌激素的所有功能，且能促进蛋白合成，加快体重和骨骼钙化，曾广泛应用于临床医学、动物性食品和丰胸化妆品等领域。由于DES 是亲脂性物质，难降解，容易在人和
动物脂肪及组织内残留，会损坏肝脏，长期使用含DES 的产品有可能会引发癌症，即使排出体外也会在水源和土壤中残留，其毒副作用［1］不容忽视。1979 年美国、加拿大及欧盟宣布禁用，之后，我国在国标中也对其使用做出了严格要求，除了作为治疗药物使用，DES 在动物性食品和动物组织中要求零检出。
    目前，对DES 的研究对象主要为动物组织、奶粉和水环境样品，据国内外现有的文献报道［2-9］，测定方法主要有放射免疫法、酶联免疫测定法、气相色谱-质谱联用法、高效液相色谱法、分光光度法等。由于DES 在实际样品中含量很低，且复杂基质对分析过程会产生严重的干扰，因此在进入仪器测试前，需要进行预处理。常用于DES 预处理的方法主要有液-液萃取和固相萃取［7］ ( solid
phase extraction，SPE) 。这两种预处理方法虽取得一定的实际应用，但也存在着一些不足，如液液萃取需要较大量的提取溶剂，固相萃取柱常出现被样品中颗粒物堵塞的现象。1990 年，Pawliszyn 和他的合作者［10］首创了固相微萃取( solid phase microextraction，SPME) 富集分离技术，主要用于气相色谱分析和液相色谱分析的样品制备。与液-液萃取和固相萃取相比，SPME 具有操作简单，样品用量小、无需或使用少量溶剂，是一种灵敏度高且简单快速的样品前处理方法。国内外现有的关于SPME 的文献报道主要应用于食品［11］、农药残留［12］、环保［13］等领域，是一种环境友好的分析方法。
    本文以商品化SPME 萃取DES，考察萃取时间、解吸时间、萃取液pH 等萃取条件对萃取效率的影响，在此基础上与HPLC 联用［14］测定食品中DES。