固相pH梯度等电聚焦实验——pH梯度的测定

丙烯酰胺单体贮液过硫酸铵贮液

由于固相 pH 梯度凝胶的导电性很低，不可能用表面电极测定凝胶表面的 pH。但对于宽范围的固相 pH 梯度可以用等电点蛋白标准来测定，方法同载体两性电解质等电聚焦。但目前还没有合适的市售蛋白标准可用于测定窄范围的固相 pH 梯度。灌制凝胶时，pH 梯度范围是已知的，且梯度是线性的。故可根据凝胶两端之间距离来测算 pH 梯度和蛋白质的 pI。在灌制非线性梯度胶时，则可根据非线性梯度来计算。