酶标仪主要酶标仪波长应用于酶联免疫吸附检测反应中检测吸光度值,其用途主要应用于ELISA试剂的测定,广泛用于各种实验室,包括临床实验室。
酶标仪测定原理是:在特定波长下,检测被测物的吸光值。
检测单位:
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度, Ι0 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。
OD值由下述公式计算:
E=OD=C×D×E
C为检测物的浓度
D为检测物的厚度
E为摩尔因子
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收zui多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波
长。
但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收zui小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。
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