圆二色谱的原理及其应用如下:
圆二色谱的原理
平面偏振光通过具有旋光活性的介质时,由于介质中同一种旋光活性分子存在手性不同的两种构型,它们对平面偏振光所分解成的右旋和左旋圆偏振光吸收不同,出射时电场矢量的振幅不同,再次合成的偏振光不是圆偏振光,而是椭圆偏振光,从而产生圆二色性。
圆二色性常用椭圆度0表示,是平面偏振光离开样品池的角度。
圆二色谱的应用圆二色谱在测定小分子化合物与DNA相互作用方面的研究主要是DNA与配基(包括小分子和蛋白质等大分子)相互作用。圆二色谱可以测定DNA和蛋白质的空间结构,DNA的圆二色谱是由其骨架结构中的不对称糖分子和由这些糖分子的构型决定的螺旋结构所产生的,根据配基对原有的DNA圆二色谱信号的影响。
以及诱导产生的圆二色谱新信号(ICD)的不同特点不仅可以得知配基与DNA具有相互作用,还能推配基与DNA结合的不同模式。小分子与DNA相互作用的典型方式有3种嵌入沟结合和烷基化金属化。很多与DNA结合的配基本身无手性。无光学活性,而与DNA相互作用后,使该配基的构象发生了改变,成为具有手性的空间排列。
也可以通过和DNA碱其的电子跃许偶极短间的偶合而产生CD信号,称为诱导的员二色谱,在小分子与DNA混合样品的C1)谱中,如观察到(0的吸收带即表示该配与DNA存在着相互作用。根据DNA与配基相互作用产生的ICD的不同特征,可以对配基与DNA的作用方式,以及DNA分子的几何形状进行定性的,经验性的推测。
DNA嵌入剂一般表现为强度最大不超过10的ICD信号,如果ICD的信号较强则表示配体与DNA小沟发生了结合(图3)。如果配基的电子跃汗保极销方向平行干碱其对的长轴方向CD信号为表示该分子的长轴与镇链DNA的碱其对间外手平行的目何位害(图A)如果垂直干碱其对的长方向ICD为负表示该分子的长轴与短链DNA的碱基对间处于垂直。
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