在微生物絮凝剂发酵罐灭菌的操作规范中加入操作注意事项

微生物絮凝剂发酵罐灭菌操作规范：

《微生物絮凝剂发酵罐灭菌操作规范》

一、目的

确保微生物絮凝剂发酵罐在使用前达到无菌状态，保证发酵过程不受杂菌污染，提高产品质量和生产效率。

二、适用范围

适用于本公司所有微生物絮凝剂发酵罐的灭菌操作。

三、职责

1. 操作人员负责按照本规范进行灭菌操作，并在操作过程中对设备进行监控和记录。

2. 设备维护人员负责对灭菌设备进行定期维护和保养，确保设备正常运行。

3. 质量控制人员负责对灭菌效果进行检测和评估。

四、灭菌前准备

1. 检查发酵罐

• 检查发酵罐的罐体、搅拌器、阀门、管道、仪表等是否完好无损，密封是否严密。

• 确保温度传感器、压力传感器、pH 传感器等检测仪器正常工作。

2. 清洁发酵罐

• 先用清水冲洗发酵罐内部，去除残留的物料和污垢。

• 再用清洁剂进行彻底清洁，然后用清水冲洗干净，确保无清洁剂残留。

3. 准备灭菌介质

• 确保蒸汽发生器工作正常，能够提供足够压力和温度的蒸汽。

• 检查蒸汽管道和阀门，确保无泄漏。

五、灭菌操作步骤

1. 关闭所有与发酵罐连接的管道阀门，包括进料阀、出料阀、取样阀、空气进口阀、排气阀等。

2. 打开蒸汽发生器，产生蒸汽。

3. 缓慢打开发酵罐夹套的蒸汽进口阀，使蒸汽进入夹套，对罐体进行预热。同时打开夹套的冷凝水排放阀，排出冷凝水。

4. 当罐体温度达到 80 - 90℃时，关闭夹套蒸汽进口阀。

5. 打开发酵罐顶部的蒸汽进口阀，使蒸汽直接进入罐内。同时打开罐底的排气阀，排出冷空气和冷凝水，直至排出的蒸汽为白色且无水珠喷出。

6. 调节蒸汽进口阀和排气阀，保持罐内压力在 0.11 - 0.12 MPa，温度在 121 - 125℃，灭菌时间持续 30 - 40 分钟。

7. 灭菌时间结束后，关闭蒸汽进口阀，停止供汽。

8. 当罐内压力降至 0.05 MPa 左右时，缓慢打开无菌空气进口阀，向罐内通入无菌空气，保持罐内正压。

六、灭菌效果验证

1. 生物指示剂检测

• 在灭菌过程中，在发酵罐内不同位置放置生物指示剂（如嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢）。

• 灭菌结束后，将生物指示剂取出，在特定条件下培养，观察其是否生长。如果生物指示剂未生长，说明灭菌效果良好。

2. 无菌试验

• 灭菌结束后，在发酵罐内接入少量无菌培养基，在适宜条件下培养一段时间。

• 观察培养基是否浑浊或有菌落生长。如果培养基保持无菌状态，说明灭菌效果良好。

七、操作注意事项

1. 灭菌前必须确保发酵罐及相关设备的清洁，避免污垢和残留物影响灭菌效果。

2. 操作人员在操作蒸汽阀门时应缓慢开启和关闭，防止蒸汽压力骤升骤降，损坏设备和造成人员烫伤。

3. 灭菌过程中要密切关注蒸汽压力、温度和发酵罐的密封情况，如有异常声响、蒸汽泄漏或压力温度失控，应立即停止灭菌操作并进行排查处理。

4. 通入无菌空气时，要确保空气过滤器的有效性，防止引入杂菌。

5. 灭菌结束后，待发酵罐冷却至适宜温度（一般低于 50℃）后再进行后续操作，避免烫伤和形成负压导致罐体损坏。

6. 在整个灭菌过程中，操作人员应严格遵守操作规程，佩戴好防护用品，如防护手套、眼罩等。

八、记录和文件管理

1. 操作人员应如实记录灭菌操作的时间、温度、压力、操作步骤、异常情况及处理措施等。

2. 质量控制人员应记录灭菌效果验证的结果。

3. 所有记录和文件应按照规定的保存期限妥善保存，以便查阅和追溯。