基因活性的同位素分析实验——原位裂解细胞的CAT分析法

转染细胞

Triton裂解液

培养皿培养箱

1.  60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞，用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液，在室温下温育2~5 min。

2.  吸去低渗缓冲液，加入400 μl Triton裂解液。用橡胶刮子将细胞刮离培养血，用1 000 μl 移液器将裂解物移入1.5  ml 微量离心管中。

3.  微量离心1 min 除去细胞核，不可溶性蛋白。将上清转入一个干净的微量离心管中， 进行CAT活性分析。